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超低分子量蛋白Marker I(3.3-20.1kDa)
R1560
240.00 / 15T
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产品说明 / Product Overview:


该超低分子量蛋白Marker I(3.3-20.1kDa)包含3种多肽和2种低分子量蛋白质组成,分子量范围为3. 3kD-20. 1kD。 可以用来判断SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。本品为蛋白质和多肽混合物的冻干粉,每种蛋白含量约为15-22.5μg,配有一支1×上样缓冲液。

使用说明:
1. 开封后,溶于150 μL 1×上样缓冲液,沸水浴5分钟,可根据需要进行小量分装,每管10μL,-20℃贮存,每次取一管使用,避免反复冻融。
2. 使用前取分装后的小管室温融化后,沸水浴5分钟即可上样电泳,用考马斯亮蓝G-250染色后可见5条蛋白带。
                                                                               
凝胶配置方法:


凝胶制备及染色注意事项:
1、 先配制分离胶,聚合后再配制夹层胶,最后配制浓缩胶,3种胶的制胶体积比为4:1.5:1。电泳时,30v跑1-2小时后,待指示前沿到达分离胶上沿时,把电压调至100v,至电泳结束,整个电泳过程大约需要6-8小时;
2、由于多肽所含的氨基酸数目较少,因此如该多肽含有过多的极性氨基酸(碱性或酸性),则会影响其在 SDS-PAGE图上的条带迁移率,即其表观分子量可能和多肽的氨基酸理论推算分子量有一定距离;
3、由于 SDS-PAGE 的图谱上,蛋白质对数分子量和迁移率成正比直线关系的分子量范围为 15,000-200,000,因此对于分子量小于 10000 的蛋白质或多肽的分子量,只能根据标准分子量进行估计,推断其是否落入预测的分子量范围;
4、由于超低分子量多肽(3000 及 3000 以下),极易从凝胶上浸出,因此染色及脱色时间不宜太长,脱色后凝胶也不宜在水中浸泡保存过久,否则条带会消失;
5、电泳之后可将胶置于固定液中固定20分钟,再进行染色,能得到较好的蛋白条带;如时间不允许,也可不进行固定直接染色。

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