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超低分子量蛋白Marker II(3.4-100kd)
R1570
360.00 / 10T
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产品说明 / Product Overview:

                                                                                                                        
该超低分子量蛋白Marker II(3.4-100kd)包含5种多肽和3种低分子量蛋白质组成,分子量范围为3.4kD-100kD。可以用来判断SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。

使用说明:
将该产品室温融化后,彻底混匀,离心快甩将溶液完全收集到管底,根据需要适量分装成小管,-20℃贮存,每次取一小管使用;本产品为即用型,融化后既能使用,不能95℃加热处理。
一. 配制分离胶:
1.按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA(19:1)、凝胶缓冲液和乙二醇加入到小烧杯中混合。
2.加入10%APS和TEMED,立即混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。
3.在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液,然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3 cm的水层,使凝胶表面保持平整。
4.静置30-60分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。
                                   
注:如非必须,不要使用1.0mm和1.5mm的凝胶,尽量使用厚度0.75mm的凝胶,这样会减少电泳后染色和脱色的时间。

二. 配制浓缩胶:
去除覆盖在分离胶上的水层,用滤纸将残留的水吸去。
1.按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA(29:1)和凝胶缓冲液加入到小烧杯中混合。
2.加入10%过硫酸铵和TEMED,立即混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。
3.将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
4.静置30-60分钟装待凝胶聚合

三. 电泳:
1. 取一管分装好的Marker样品,彻底融化,不要加热处理,充分混匀后备用。
2. 电泳前,将10×Tris-Tricine-SDS电泳缓冲液(Cat No:CB010)用蒸馏水稀释成1×缓冲液备用。将电泳槽的内外槽加入1×缓冲液,轻柔拔出梳子,将Marker或蛋白样品(样品已经过2×Tricine上样缓冲液[Cat No:TP050]处理)加入点样孔,根据表二条件进行电泳,至蓝色指示前沿至分离胶3/4位置时即可停止电泳。整个电泳过程大约需要2-3个小时。
注:如果电泳时间过短,染色时,指示前沿容易遮挡小于5kd的小肽。
                        
四. 染色:
根据常规实验步骤,用配方5和6(表三)进行染色和观察。如果使用配方5进行染色时效果不好或考虑其毒性,请选择本公司的FastBlue蛋白染色液,该产品能在5分钟之内完成蛋白的染色,不至于小肽在染色和脱色中从凝胶中脱离,是常规染色液的理想替代品。

储存条件: -20℃保存,开封后有效期12个月。
 

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