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预染超低分子量蛋白Marker(3.3kD-31.0kD)
R1640
300.00 / 20T
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产品说明 / Product Overview:


该预染超低分子量蛋白Marker(3.3kD-31.0kD)包含预染的3种多肽和2种低分子量蛋白质组成,分子量范围为3. 3kD-31. 0kD。可以用于直接观察蛋白质电泳状况以及清晰地判断Western Blot的转膜效果。经Tricine-甘油SDS-PAGE凝胶电泳时以及转移到PVDF或NC膜上可看到清晰的5条蓝色的蛋白条带。本品为蛋白质和多肽混合物的冻干粉,每种预染蛋白含量约为40μg,配有一支1×上样缓冲液。

使用说明:
1. 开封后,溶于200 μ1 1×上样缓冲液,可根据需要进行小量分装,每管10 μl,-20℃贮存,每次取一管使用,避免反复冻融。
2. 使用前取分装后的小管室温融化后即可上样电泳。

电泳示意图:
                                                                        
凝胶的配置方法:


凝胶制备及染色注意事项:
1. 先配制分离胶,聚合后再配制夹层胶,最后配制浓缩胶,3种胶的制胶体积比为4:1.5:1。电泳时,30V跑1-2h后,待指示前沿到达分离胶上沿时,把电压调至100V,至电泳结束,整个电泳过程大约需要6-8h;
2. 电泳之后可将胶置于固定液中固定20min,再进行染色,能得到较好的蛋白条带;如时间不允许,也可不进行固定直接染色;
3. 由于多肽所含的氨基酸数目较少,因此如该多肽含有过多的极性氨基酸(碱性或酸性),则会影响其在SDS-PAGE图上的条带迁移率,即其表观分子量可能和多肽的氨基酸理论推算分子量有一定距离;
4. 由于SDS-PAGE的图谱上,蛋白质对数分子量和迁移率成正比直线关系的分子量范围为15,000-200,000,因此对于分子量小于10000的蛋白质或多肽的分子量,只能根据标准分子量进行估计,推断其是否落入预测的分子量范围;
5. 由于超低分子量多肽(3000及3000以下),极易从凝胶上浸出,因此染色及脱色时间不宜太长,脱色后凝胶也不宜在水中浸泡保存过久,否则条带会消失。
 

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