已知的人类雌激素有20多种,其中一种雌酮作为女性荷尔蒙,与性功能的发育和妊娠功能的发育密切相关。芳香化酶是合成雌激素的酶之一,是在胆固醇制造性激素的途径中将雄烯二酮可逆地转化为雌酮的酶,在调节性激素的平衡中起重要作用。
近年来,人们发现有环境激素通过影响这种芳香化酶来影响雌性激素的合成,导致性分化和生殖功能异常(阿特拉津、有机锡等)。此外,在河水和排水等环境水体中检测到雌酮等雌性激素,导致鱼类繁殖异常。由于这些原因,已经开始使用利用芳香酶活性的环境激素的筛选方法。实际上,有一种向人卵巢颗粒细胞系KGN细胞中加入雄烯二酮,并用雌酮EIA试剂盒测定芳香酶作用转化产生的雌酮的方法或测定游离[3H]H2O放射性的方法。使用这些方法,可以通过测量由雄烯二酮转化和生成的雌酮量来间接确定对芳香酶活性的影响。然而,雌酮EIA试剂盒存在因与雄烯二酮和睾酮交叉反应导致本底高等问题,且测定游离[3H]H2O放射性的方法是放射性同位素(不适合筛选,因为RI)使用和测量需要复杂的操作和时间。
因此,我们开发了一种新的雌酮 EIA 试剂盒,可解决由于非放射性测量系统中抗体特异性引起的背景问题。该试剂盒与雄烯二酮和睾酮的交叉反应性极低,是一条河流。河水、排水等环境水体中的雌酮可以特异性地、高灵敏度地进行测定。此外,可以测量雌酮,它是培养基中芳香酶反应的产物之一。
▼ 可在 4.8 至 5000 pg/mL 的范围内进行测量。
▼ 可以测量环境水和培养液样品。
▼ 样品体积为 100 μL。
▼ 同时重现性环境水 CV (%) 5.75 至 15.99 培养液 CV (%) 3.70 至 15.59
▼ 日差重现性环境水 CV (%) 5.98 至 14.50 培养液 CV (%) 4.90 至 19.69
交叉反应性
化合物 交叉反应性 (%)
雌酮 100
17β-雌二醇 30.6
雌三醇 0.4
睾酮 <0.0049
孕酮 <0.0049
4-雄甾烯-3,17-二酮 <0.0049
胆固醇 <0.004