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QuantiTect Rev.Transcription Kit (400)
货号:205314 | 规格:400 Reactions | 价格:¥0.00 | 品牌:QIAGEN
快速合成cDNA,进行两步法real-time RT-PCR,用于基因表达分析;cDNA合成和gDNA去除仅用20分钟完成,即便是低丰度的转录本也能获得高产量的cDNA,转录本的5'和3'端区域都可以进行cDNA合成,无需设计RNA特异性引物或探针。

快速合成cDNA,进行两步法real-time RT-PCR,用于基因表达分析


Features

cDNA合成和gDNA去除仅用20分钟完成

即便是低丰度的转录本也能获得高产量的cDNA

转录本的5'和3'端区域都可以进行cDNA合成

无需设计RNA特异性引物或探针


Product Details

QuantiTect Reverse Transcription Kit通过方便快速的操作过程进行cDNA合成,并有效去除基因组DNA。应用gDNA Wipeout Buffer可高效去除RNA样本中的基因组DNA污染。QuantiTect Reverse Transcription Kit提供所有快速、高效逆转录所需的组分,包括Quantiscript Reverse Transcriptase、Quantiscript RT Buffer和独特的RT Primer Mix。合成的cDNA经过优化可用于real-time PCR,实现对mRNA转录本所有区域的靶分子进行可靠的定量检测。


Performance

使用QuantiTect Reverse Transcription Kit,基因组DNA污染物可使用独特的gDNA Wipeout Buffer迅速有效的去除。去除基因组DNA对于准确的基因表达结果非常重要,而并不总是可以设计RNA特异性引物或探针。使用gDNA Wipeout Buffer可节省时间和费用,因为纯化RNA样品过程中或纯化后均无需另外采用DNase消化。


Quantiscript Reverse Transcriptase的高RNA亲和性配合Quantiscript RT Buffer可从各种RNA模板中获得高产量cDNA。即使复杂的模板也能成功逆转录,如GC含量高或有复杂二级结构的模板。



Principle

QuantiTect Reverse Transcriptase是Omniscript和Sensiscript Reverse Transcriptases的新型混合物,对RNA具有高亲和性,可从各种含量的RNA(10 pg到1 µg)合成cDNA。与其他供应商提供的试剂盒相比,QuantiTect Reverse Transcription Kit为real-time PCR分析提供高产量的cDNA,无需考虑待扩增目标序列位于转录本的哪个区域。即使复杂的模板也能成功逆转录,如GC含量高或有复杂二级结构的模板。QuantiTect RT Buffer已经过优化,可与real-time PCR缓冲液兼容。


为获得准确的real-time RT-PCR基因表达分析结果,很重要的是仅扩增和检测cDNA。基因组DNA的干扰可通过设计横跨外显子/外显子边界的引物或探针避免。尽管如此,在某些特殊情况下(如:cDNA来自一个单外显子基因),起始RNA样品必须无基因组DNA。使用QuantiTect Reverse Transcription Kit,基因组DNA污染物可使用独特的gDNA Wipeout Buffer迅速有效的去除。使用gDNA Wipeout Buffer可节省时间和费用,因为纯化RNA样品过程中或纯化后均无需另外采用DNase消化。另外,不需要设计RNA特异性引物或探针。


QuantiTect Reverse Transcriptase Kit的组份

组份                                                        优势

gDNA Wipeout Buffer                           在real-time RT-PCR时仅检测RNA

Quantiscript Reverse Transcriptase       适用的RNA起始量范围大(10 pg到1 µg RNA)、灵敏度高

Quantiscript RT Buffer                           处理复杂模板

RT Primer Mix                                        对转录本的各个区域,包括5'区进行cDNA合成


Procedure

使用QuantiTect Reverse Transcription Kit可在20分钟内去除基因组DNA和合成cDNA。由于两个反应均在同一孵育温度并使用预混液构建反应,因此操作过程快速且方便。


QuantiTect Reverse Transcription Kit包括快速合成cDNA所需的所有组分。纯化的RNA只需简单地与gDNA Wipeout Buffer孵育,即可有效去除污染的基因组DNA。与其他的方法相比,使用Quantiscript Reverse Transcriptase、Quantiscript RT Buffer和RT Primer Mix制备的预混液可将RNA样品直接进行逆转录。使用Quantiscript Reverse Transcriptase,即使具有复杂的二级结构的RNA也可在低温下转录,确保RNA保持完整:整个反应都在42°C下完成,并在95°C失活。不需要RNA变性、引物退火和RNase H消化。



Applications

QuantiTect Reverse Transcription Kit可从各种类型的起始样本中合成cDNA,以实现高效和高灵敏度的real-time RT-PCR。样本类型包括激光显微切割样本和活组织切片。


Specifications

Features                           Specifications

Applications                    Quantification of (even low-abundance) transcripts

Sample/target type         RNA template

Enzyme activity               Reverse transcription

Real-time or endpoint    Real time

Reaction type                 Two-step, cDNA production, genomic DNA digestion

Single or multiplex         Single

Mastermix                       No


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