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Dark Reader常见问题解答
2020-12-29 142 分享到:

FAQ - Dark Reader Components  Dark Reader组件常见问题

您是否必须使用琥珀色的眼镜来保护眼睛?

眼镜不是为了保护眼睛。(实际上,请勿将眼镜与防紫外线装置一起使用,因为它们不能提供防紫外线的保护!)

暗读取器发出的光是100%可见的蓝色。它是明亮的,因此您不应太长时间直接观看(没有放置眼镜或琥珀色的屏幕),就像其他可见光源一样,但是其中的紫外线为零。眼镜的功能是光学的-它们可以防止蓝色激发光淹没样品中微弱的荧光。眼镜具有与琥珀色屏幕和DR相机滤镜完全相同的光学特性。当您从凝胶中切出条带时,该眼镜特别有用。它们使您免于尝试在琥珀色屏幕上工作。

DR46的蓝光区域的实际大小与整个盒子的外部尺寸是多少?

观察表面为15 x 19厘米。外部尺寸只有18.5 x 22.5厘米,稍大一些。请查看透照器页面,以了解我们所有单元的更多物理尺寸。

蓝屏对刮擦的抵抗力如何?

蓝屏由塑料制成,比UV屏更容易刮擦。但是,这不是Dark Reader性能的重要因素-我们已经在克隆实验室中使用Dark Reader几年了,并且每天都在使用(和滥用)它。尽管在普通实验室照明下观看时,蓝色表面有些刮擦,但在操作中,除最严重的刮擦外,所有其他擦痕都消失了。为了在切割DNA条带时保护蓝屏,可以在凝胶下放置一块普通玻璃,而不会降低灵敏度。此外,请记住,我们可以以约200美元的价格更换蓝屏,而购买新的UV屏则要多花费数百美元。

还要注意,蓝屏比典型的UV屏更具抗冲击性:将相机放在Dark Reader上,蓝屏将保持原样。(相机上不保证。)

哪个具有更高的强度,DR46或DR89?

DR46和DR89(实际上是我们所有的透照器)都具有几乎相同的光强度。请注意,更强烈的激发并不一定会帮助您检测更少量的荧光。检测水平将受到来自样品的荧光信号与凝胶背景之间的差异的限制,并且无论激发强度如何,该比率都将相同。

LED可持续使用多长时间?

我们所有设备使用的LED的额定寿命为50,000小时(每天运行8小时超过17年!)。


FAQ - Imaging 成像常见问题

哪些数码相机可与Dark Reader配合使用?

几乎可以使用任何数码相机-您的手机可以拍摄出出色的DNA凝胶照片。不过,一般而言,首选手动控制曝光时间,对焦和f-stop的数码相机。许多研究人员喜欢佳能G系列相机。

DR89透照仪可以和我们的“ XYZ”成像仪一起使用吗?

是的,它会存在:

有两个可能的问题:

–机柜的物理尺寸–对于Dark Reader Transilluminator是否足够大?

–机柜的电源。您的成像仪可能使用其他样式的插头,因此您可能需要适配器。我们有几种样式。

我们有一台使用紫外线透照仪的EtBr凝胶相机。我需要一个新的过滤器吗?

您应该始终使用深色阅读器滤镜–琥珀色屏幕或单独的DR摄像机滤镜。该过滤器经过优化,可与Dark Reader配合使用。基本的透射照明器包装中包括琥珀色的屏幕。

为什么我们的照片模糊不清?

有两种可能:

–琥珀色屏幕的下面可能会形成冷凝水。如果凝胶是温暖的,就会发生这种情况。冷凝水很难直接看到,但会导致照片模糊不清并失去灵敏度。补救措施是使用单独的DR相机滤镜,或者简单地在凝胶上放一块保鲜膜。

-您的相机处于“自动”模式。在拍摄荧光DNA凝胶时所涉及的特殊照明条件可能会使自动对焦变得混乱。切换到“手动”模式。

我想为数码相机购买Dark Reader相机滤镜。哪个过滤器适合?

无论向谁提供相机,都应解决该问题。可以在www.dpreview.com上找到许多相机的规格。

您是建议在相机上使用滤镜还是直接使用琥珀色屏幕?

琥珀色屏幕和DR摄像机滤镜的光学特性是相同的,但是通常使用单独的滤镜将是一种更灵活的方法。


FAQ - DNA & Protein Stains  DNA和蛋白染色常见问题

Dark Reader Transilluminator对DNA检测有多敏感?

最常见的染料总结:

WX20201229-112408.png

新的DNA染料的价格是多少?

新的DNA染色剂的购买价格肯定高于EtBr。但是,重要的是要记住,例如,SYBR Green的敏感性是EtBr的5 -10倍,并且诱变性较低。许多人会认为这些优势足以抵消额外的成本。

由于新一代的DNA染色剂通常比EtBr敏感5至10倍,因此可以相应地装载更少的DN Asize标准品和PCR反应。这样可以节省大量资金。

我的凝胶非常薄且脆弱。我可以在Dark Reader的玻璃板上观看吗?

是的你可以。没问题。因为深色阅读器灯全是可见的蓝色,所以它很容易穿过玻璃和塑料,并且几乎不损失灵敏度。Dark Reader也可以很好地观察塑料管,培养皿,96孔板等中的荧光团。

为什么我的DNA泳道被涂污了?

DNA太多!许多新污渍的敏感性至少是EtBr的10倍。因此,如果您要加载“正常量”的DNA,您将看到各种各样的schmutz!将负载在凝胶上的DNA减少5-10倍。

Dark Reader是否可以与EtBr或GelRed一起使用?

EtBr和GelRed都是紫外线污渍,在UV盒子上总是看起来更好。可以在Dark Reader上看到DNA,但看起来永远不会很漂亮。为了最大程度地利用EtBr进行观看,重要的是:

–在完全黑暗的房间中观看,并让您的眼睛稍作调整。

–使用较少量的EtBr(0.2 – 0.5 ug / mL)

–加载大量DNA(20+ ng /条带)


FAQ - 其他问题

为什么要担心紫外线暴露?我在带有CCD相机的遮光罩内使用了一个紫外线盒。

您受到很好的保护,但是您的DNA样本呢?在您调整焦点,固定变焦并设置DNA熟化时间之前。如果您打算将DNA用于进一步的反应,则必须应对大量的DNA损伤。

我们的研究表明,少于5秒的紫外线暴露时间足以严重破坏DNA。另一方面,在黑暗阅读器上暴露5分钟不会对DNA造成可测量的损害。(在紫外线盒上放置5分钟后,DNA断裂得非常厉害,几乎无法检测到。)

我的荧光团在534 nm处激发。它与Dark Reader兼容吗?

激励的最大值似乎有些长。但是,从整个光谱来看,在500 nm以下有明显的激发,这就是Dark Reader会“追求”的。四甲基罗丹明(546/576)是具有我们所体验到的最接近光谱特征的染料,这在Dark Reader中表现出令人惊讶的良好效果(尽管不如荧光素那么好)。如果不确定您的特定应用程序,请给我们发送电子邮件,我们会为您提供适用性建议,甚至安排演示单元供您尝试!

DR是否可以与GFP一起使用?

GFP在395和470 nm处有2个激发峰。470 nm峰被Dark Reader最大激发,当用DR光线照射时,红移变体(例如EGFP和EYFP)发荧光。另外,DR不会导致GFP暴露于紫外线下而迅速发生光致漂白。使用Dark Reader通常无法实现野生型GFP的可视化。

深色阅读器射灯能否用于观察植物中的EYFP?

是的,Dark Reader可用于轻松,安全地查看植物,动物和微生物中的荧光蛋白。以下是一些注意事项。

请记住:您可以随时与我们联系,在tech_support上讨论您的特定实验设置。

1.荧光蛋白的类型–诸如EGFP,EYFP,dsRed和mCherry的变体与Dark Reader搭配使用效果很好。野生型GFP没有。

2.“背景干扰”的水平。例如,叶绿素将发出荧光,这尤其可以掩盖红色荧光信号。

3. GFP在生物体中的表达水平–很难事先知道它是否足够高–您可能必须尝试使用Lamp来观察。我们通常会

提供演示灯。请通过演示与我们联系。

4.样品的大小–您的样品(例如,胚胎和幼苗)在物理上可能太小,以至于肉眼看不到任何荧光。

我想知道Dark Reader是否可用于荧光TLC板上PAGE凝胶中的寡核苷酸可视化。

我想我理解这个问题–您想通过PAGE分离寡核苷酸,然后将凝胶放在荧光TLC板上,寻找由寡核苷酸吸收激发光引起的“阴影”。对?

不幸的是,答案是否定的。寡核苷酸在约260 nm处吸收。黑暗阅读器发出的光在400-500 nm之间。因此,寡核苷酸将不会吸收Dark Reader激发光,而TLC板将在寡核苷酸后面发出荧光-不会有“阴影”!

Dark Reader在96孔板上表现如何?

非常好。由于暗读器使用的激发光可以穿透大多数塑料和玻璃,因此暗读器对检测荧光素(例如96孔板、离心管等)的灵敏度比紫外透光器高8倍。