花青素3单琥珀酰亚胺酯[相当于Cy3® NHS酯]
货号：141
品牌：AAT Bioquest
产品特性
橙色荧光：提供明亮、光稳定的信号，适用于显微镜和流式细胞术中的532 nm激光激发
胺反应性偶联：在pH 8.5条件下与赖氨酸残基形成稳定的酰胺键，实现高效的蛋白质和抗体标记
多色成像应用：与FITC和Cy5兼容，可用于免疫荧光和FISH的三重标记实验。
| 规格 | 价格 |
|---|---|
| 1 mg | ￥咨询 |
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详细介绍
产品名称：花青素3单琥珀酰亚胺酯[相当于Cy3® NHS酯]
别名：Cyanine 3 monosuccinimidyl ester ；Cy3® NHS ester；Cy3 NHS ester；Cy3 NHS酯；CAS 146368-16-3
CAS号：146368-16-3
储存条件：冷冻（< -15 °C）；避光保存
花青素3单琥珀酰亚胺酯是一种胺反应性橙色荧光染料，能与蛋白质和抗体形成稳定的酰胺键，广泛用于制备用于显微镜和流式细胞术的明亮、光稳定的生物偶联物。
橙色荧光：提供明亮、光稳定的信号，适用于显微镜和流式细胞术中的532 nm激光激发。
胺反应性偶联：在pH 8.5条件下与赖氨酸残基形成稳定的酰胺键，实现高效的蛋白质和抗体标记。
多色成像应用：与FITC和Cy5兼容，可用于免疫荧光和FISH的三重标记实验。
概述
Cy3® NHS酯（GE Healthcare）与花青素3单琥珀酰亚胺酯在化学上是等价的，都是通过靶向氨基基团来标记生物分子的反应性染料。
背景
Cy3是一种属于花青染料家族的黄色荧光染料。它有时也被称为Sulfo-Cy3；两者在化学上是等价的。相比之下，非磺化Cy3不含SO3-基团。因此，非磺化Cy3的水溶性低于Cy3，且在水溶液中形成聚集体的可能性增加。正因如此，磺基-Cy3和Cy3比非磺化Cy3要常见得多。
使用方法
Cy3 NHS酯的分子量为829.03道尔顿。它以红色粉末形式提供，可用DMSO复溶。NHS酯官能团使其易于与含有伯胺基团的靶标（如蛋白质和抗体的赖氨酸残基或胺修饰的寡核苷酸）偶联。标记反应在染料和生物分子之间形成共价键；为获得最佳效率，反应应在pH = 8.5 ± 0.5的缓冲液中进行。反应后，应计算偶联物的标记度（DOL）。这一点很重要，因为过度标记（即高DOL）可能导致Cy3荧光团的自淬灭。
激发/发射
Cy3有两个重要的波长：激发峰在555 nm，发射峰在569 nm。当被合适的光源（如532 nm或555 nm激光）激发时，它会发出黄色荧光。因此，兼容的荧光通道包括Cy3或TRITC滤光片组。Cy3的荧光相当耐受pH值变化，可耐受pH 4至pH 10。
应用
Cy3可与抗体偶联，用于免疫荧光（IF）和免疫细胞化学（ICC）应用。例如，用小鼠抗微管蛋白一抗处理细胞，再用Cy3标记的山羊抗小鼠IgG二抗孵育，可用于可视化细胞骨架结构。
第二个应用是使用Cy3标记寡核苷酸。在荧光原位杂交（FISH）中，Cy3标记的寡核苷酸探针能够对细胞中的遗传物质进行空间定位。与淬灭剂结合使用时，Cy3-寡核苷酸偶联物可用作实时荧光定量PCR技术的TaqMan探针（或分子信标）。
其他形式
Cy3也提供带有马来酰亚胺基团的形式。这使其能够与含有巯基的蛋白质和抗体（如半胱氨酸残基）偶联。要在化学合成过程中将Cy3掺入寡核苷酸，可以使用Cy3亚磷酰胺。在此过程中，亚磷酰胺从3'到5'方向添加。
Cy5是Cy3的替代品，属于同一荧光染料家族。其激发波长为651 nm，发射波长为670 nm。
Cy3B是Cy3的一种类似物，更能抵抗内部去激发，从而导致测得的荧光信号增加并提高光稳定性。
iFluor® 555是一种光谱相似的荧光染料，具有更高的水溶性和亮度，同时光漂白减少且成本更低。
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橙色荧光：提供明亮、光稳定的信号，适用于显微镜和流式细胞术中的532 nm激光激发。
胺反应性偶联：在pH 8.5条件下与赖氨酸残基形成稳定的酰胺键，实现高效的蛋白质和抗体标记。
多色成像应用：与FITC和Cy5兼容，可用于免疫荧光和FISH的三重标记实验。
概述
Cy3® NHS酯（GE Healthcare）与花青素3单琥珀酰亚胺酯在化学上是等价的，都是通过靶向氨基基团来标记生物分子的反应性染料。
背景
Cy3是一种属于花青染料家族的黄色荧光染料。它有时也被称为Sulfo-Cy3；两者在化学上是等价的。相比之下，非磺化Cy3不含SO3-基团。因此，非磺化Cy3的水溶性低于Cy3，且在水溶液中形成聚集体的可能性增加。正因如此，磺基-Cy3和Cy3比非磺化Cy3要常见得多。
使用方法
Cy3 NHS酯的分子量为829.03道尔顿。它以红色粉末形式提供，可用DMSO复溶。NHS酯官能团使其易于与含有伯胺基团的靶标（如蛋白质和抗体的赖氨酸残基或胺修饰的寡核苷酸）偶联。标记反应在染料和生物分子之间形成共价键；为获得最佳效率，反应应在pH = 8.5 ± 0.5的缓冲液中进行。反应后，应计算偶联物的标记度（DOL）。这一点很重要，因为过度标记（即高DOL）可能导致Cy3荧光团的自淬灭。
激发/发射
Cy3有两个重要的波长：激发峰在555 nm，发射峰在569 nm。当被合适的光源（如532 nm或555 nm激光）激发时，它会发出黄色荧光。因此，兼容的荧光通道包括Cy3或TRITC滤光片组。Cy3的荧光相当耐受pH值变化，可耐受pH 4至pH 10。
应用
Cy3可与抗体偶联，用于免疫荧光（IF）和免疫细胞化学（ICC）应用。例如，用小鼠抗微管蛋白一抗处理细胞，再用Cy3标记的山羊抗小鼠IgG二抗孵育，可用于可视化细胞骨架结构。
第二个应用是使用Cy3标记寡核苷酸。在荧光原位杂交（FISH）中，Cy3标记的寡核苷酸探针能够对细胞中的遗传物质进行空间定位。与淬灭剂结合使用时，Cy3-寡核苷酸偶联物可用作实时荧光定量PCR技术的TaqMan探针（或分子信标）。
其他形式
Cy3也提供带有马来酰亚胺基团的形式。这使其能够与含有巯基的蛋白质和抗体（如半胱氨酸残基）偶联。要在化学合成过程中将Cy3掺入寡核苷酸，可以使用Cy3亚磷酰胺。在此过程中，亚磷酰胺从3'到5'方向添加。
Cy5是Cy3的替代品，属于同一荧光染料家族。其激发波长为651 nm，发射波长为670 nm。
Cy3B是Cy3的一种类似物，更能抵抗内部去激发，从而导致测得的荧光信号增加并提高光稳定性。
iFluor® 555是一种光谱相似的荧光染料，具有更高的水溶性和亮度，同时光漂白减少且成本更低。
