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凯杰游离核酸制备方案-QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit

研究方向：DNA纯化及检测

QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit ⸺ QIAGEN最经典的游离核酸纯化产品
从人类血清 / 血浆或羊水等体液中浓缩并纯化游离DNA和RNA，多用于非侵入性的母体外周血胎儿核酸检测以及肿瘤检测等。QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit简化了从体液中纯化游离DNA和RNA的过程，可从含有低浓度DNA和RNA片段的样本中高效纯化、浓缩核酸。

QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit 确保:

• 核酸浓缩，起始体积高达 5 ml，洗脱体积低至 20 μl，高效回收DNA和RNA片段
• 无需有机溶剂抽提或乙醇沉淀
• 有效去除杂质和抑制因子
• 需要搭配 QIAvac 24 真空底座使用

	显著特点 • 浓缩的核酸，高上样量，低洗脱体积 • 高效回收DNA和RNA碎片 • 无需有机提取或乙醇沉淀 • 完全去除污染物和抑制剂



	QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit大大简化了从血浆或血清中浓缩和纯化游离DNA和RNA的过程。

	分析血液中肿瘤特异性的胞外DNA片段和mRNA可对普通血液样品进行特异性地肿瘤类型检测。这些存在于血清或血浆中的游离核酸通常都是<1000 bp（DNA）或<1000 nt（RNA）的片段。此外，小至21 nt的miRNAs可作为某些癌症和疾病状态的生物标记。 QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit可从人类血浆、血清和其他无细胞体液中高效纯化游离核酸。纯化效率高、重现性好、产量高。应用延长的上样管和真空装置QIAvac 24 Plus可将样品处理量提至5 ml，洗脱体积可在20–150 μl之间灵活变化，可浓缩低浓度核酸。该试剂盒采用先进的技术，硅胶膜选择性的结合目标核酸，提高片段化核酸的回收率。使用RNase-Free DNase Set进行DNA柱上消化，纯化获得不含DNA的游离RNA 。特别设计的流程确保高效纯化诸如miRNA等小RNA。使用QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit高效纯化甲基化DNA，经纯化的DNA维持其甲基化状态，可进行亚硫酸氢盐转化实验，进行甲基化状态分析。经纯化和浓缩的游离DNA和RNA不含蛋白、核酸酶和其他杂质，可即用于各种下游应用，包括： PCR 和定量real-time PCR以及RT-PCR 用于基于血液样品的癌症生物标记的研究、验证和检测病毒核酸检测

	原理 QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit简化了从血浆或血清中纯化游离DNA和RNA的过程。无需苯酚-氯仿抽提。核酸特异性结合到QIAamp Mini离心柱上，污染物流走。PCR抑制物，如：二价阳离子和蛋白，可通过三步有效的洗涤步骤被完全去除，结合在离心柱上的纯核酸可用水或试剂盒中的缓冲液洗脱。使用QIAamp Circulating Nucleic Acid技术从人类血浆、血清或尿液中获得游离的DNA和RNA。 QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit有可选择性结合的硅胶膜和20–150 μl灵活的洗脱体积。使用RNase-Free DNase Set进行DNA柱上消化，可纯化游离RNA。		Efficient purification of circulating miRNA. Circulating RNA was purified from 4 ml pooled plasma using the QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit, with an elution volume of 50 μl. The standard kit protocol was compared with the specialized protocol for miRNA. miRNA 30b yield was quantified using a TaqMan microRNA assay (Applied Biosystems), and miRNA 16 yield was quantified using a Human miScript Assay (QIAGEN). The lower CT values with the miRNA protocol indicate higher yields of the miRNA species.

	应用 QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit可从含低浓度DNA和RNA碎片的原始样本（人血浆中常规游离DNA的浓度为1–100 ng/ml）中纯化和浓缩游离的DNA、RNA、miRNA，包括病毒核酸。起始样本体积至多5 ml。 QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit可从以下样本类型中纯化和浓缩核酸：人类血浆血清尿液		Improved recovery of fragmented DNA Circulating DNA was purified from 5 ml plasma using the QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit or from 1 ml plasma using the QIAamp MinElute Virus Vacuum Kit, with elution volumes of 100 μl. DNA yield was quantified by duplex, real-time PCR of a 66 bp amplicon and a 500 bp amplicon within the 18S rRNA gene using the QuantTect Multiplex PCR Kit. The difference between amplification of the 500 bp amplicon and 66 bp amplicon shows that the DNA is fragmented, resulting in a lower abundance of intact 500 bp target sequences compared with the shorter 66 bp target. (Note that the difference is greater than the fivefold difference in sample input volumes.)