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Calbryte™钙离子指示剂 | 无需丙磺舒,亮度超Fluo-4两倍

研究方向:钙离子检测

Calbryte™ 钙离子指示剂系列

 

中文导读

Calbryte™ 是 AAT Bioquest 开发的新一代荧光钙离子指示剂,在亮度、信噪比和光稳定性方面均实现了对传统荧光素类钙指示剂的显著超越。该系列提供绿色(Calbryte™ 520)、橙色(Calbryte™ 590)和远红(Calbryte™ 630)三种光谱选择,并针对不同钙浓度范围提供多种亲和力变体。Calbryte™ 最突出的优势在于无需使用丙磺舒(probenecid) 即可实现优异的细胞内留滞,从根本上避免了丙磺舒可能带来的细胞毒性问题,尤其适合原代细胞、神经元和对化学抑制剂敏感的实验体系。

 


AAT Bioquest的Calbryte™ 指示剂是新一代荧光钙探针,经过工程化设计,相比早期基于荧光素的钙指示剂,具有更高的亮度、改善的信噪比和增强的光稳定性。Calbryte™ 系列覆盖多个波长(绿色、橙色和远红)和多种钙亲和力,为监测活细胞内的钙动态提供了多样化的工具,其中特定形式已针对高通量筛选和流式细胞术进行了优化。

  指示剂系列   Ex/Em (nm)   Kd (Ca²⁺ 亲和力)   最佳应用  
  Calbryte™ 520   493/515(绿色)   ~1.2 µM(中等)   常规钙流检测,GPCR筛选,HTS  
  Calbryte™ 520L   493/515(绿色)   ~91 µM(低)   较高钙浓度环境,减少缓冲效应  
  Calbryte™ 520XL   493/515(绿色)   ~300 µM(极低)   内质网钙,高 [Ca²⁺] 环境  
  Calbryte™ 590   581/593(橙色)   ~1.4 µM(中等)   与绿色探针多重标记,降低自发荧光  
  Calbryte™ 630   607/624(远红)   ~1.2 µM(中等)   深层组织成像,多色实验  
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Calbryte™ 520 系列(绿色荧光)


Calbryte™ 520系列提供明亮的绿色荧光(Ex/Em = 493/515 nm),兼容标准 FITC 滤光片组。这些指示剂有三种钙亲和力变体可供选择,以满足不同的实验要求:标准型(Kd ~1.2 µM)、低亲和力型“L”(Kd ~91 µM)和极低亲和力型“XL”(Kd ~300 µM)。


关键特点

» 信号强度比Fluo-4 AM强2–3倍,信噪比显著改善

» 优异的光稳定性,适用于长时间延时成像和动力学研究

» 出色的细胞通透性,AM酯形式便于活细胞负载

» 多种亲和力选项,可匹配从胞质(nM)到内质网/细胞器(µM-mM)的生理钙浓度范围

» 兼容标准FITC/GFP滤光片组和微孔板读数仪

   
  使用Calbryte™ 520 AM(货号20653)和Fluo-4 AM(货号20550)在CHO-K1细胞中测量的ATP响应。CHO-K1细胞以50,000个细胞/100 µL/孔过夜接种于96孔黑壁透明底Costar板。向孔中加入100 µL含丙磺舒的HH缓冲液中的10 µg/mL Calbryte™ 520 AM或含丙磺舒的HH缓冲液中的10 µg/mL Fluo-4 AM,在37°C孵育45分钟。移除两种染料负载液并替换为200 µL HH缓冲液/孔。加入ATP(50 µL/孔)以达到所示的终浓度10 µM。图像在Keyence显微镜上使用FITC通道采集  


Calbryte™ 520钙指示剂订购信息

 
产品编号
 
产品名称
 
规格
 
形式
 
细胞通透性
  20651   Calbryte™ 520 AM   10x50 ug   AM Ester   Cell-permeable
  20658   Calbryte™ 520, potassium salt   10x50 ug   Salt   Cell-impermeable
  20640   Calbryte™-520L AM   10x50 ug   AM Ester   Cell-permeable
  20642   Calbryte™-520L, potassium salt   10X50 ug   Salt   Cell-impermeable
  20646   Calbryte™-520XL AM   10x50 ug   AM Ester   Cell-permeable

 

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Calbryte™ 590和630(橙红和远红荧光)


对于多重标记实验或需要降低自发荧光干扰的应用,Calbryte™ 590(橙色,Ex/Em = 581/593 nm)和Calbryte™ 630(远红,Ex/Em = 607/624 nm)提供了优于绿色指示剂的出色替代方案。这些长波长指示剂与FITC/GFP发射光谱的重叠极小,尤其适用于表达GFP的细胞或其他绿色荧光探针的多色成像。


关键特点

» 橙红和远红发射,可与绿色荧光蛋白和探针进行多重标记

» 与绿色指示剂相比,细胞自发荧光更低

» 更好的组织穿透能力,适用于较深层次的成像应用(尤其是 Calbryte™ 630)

» 中等钙亲和力(Kd ~1.1–1.4 µM),适用于大多数胞质钙测量

» 可作为AM酯和钾盐使用,为实验设计提供灵活性

Calbryte™ 590和630钙指示剂订购信息

 
产品编号
 
产品名称
 
规格
 
形式
 
细胞通透性
  20702   Calbryte™ 590 AM   1 mg   AM Ester   Cell-permeable
  20707   Calbryte™ 590, potassium salt   1 mg   Salt   Cell-impermeable
  20722   Calbryte™ 630 AM   1 mg   AM Ester   Cell-permeable
  20727   Calbryte™ 630, potassium salt   5x50 ug   Salt   Cell-impermeable

 

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Calbryte™ 钙检测试剂盒


为简化高通量筛选和流式细胞术的工作流程,AAT Bioquest提供以Calbryte™指示剂为特色的即用型钙检测试剂盒。这些优化的配方无需丙磺舒(一种有机阴离子转运蛋白抑制剂)和洗涤步骤,实现了更简便的方案和卓越的性能。


关键特点

» 无需丙磺舒的配方,消除了对细胞生理的潜在干扰
» 免洗方案简化了工作流程,减少了手动操作时间
» 针对HTS优化,在微孔板格式中具有一致的孔间性能
» Screen Quest™ 试剂盒包含所有必要的试剂和缓冲液,可立即使用
» Cell Meter™ 试剂盒专门针对流式细胞术应用进行了优化

Calbryte™ 钙测定试剂盒订购信息

 
产品编号
 
产品名称
 
 规格
 
 应用
  36319   Screen Quest™ Calbryte-520 Probenecid-Free and Wash-Free Calcium Assay Kit   100 Plates   HTS, GPCR screening
  36200   Screen Quest™ Calbryte-590 Probenecid-Free and Wash-Free Calcium Assay Kit   1 Plate   HTS, GPCR screening
  36310   Cell Meter™ Flow Cytometric Calcium Assay Kit   100 Tests   Flow cytometry

 


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